ISSN: 1300-0292
İndekslendiği Dizinler: SCIENCE CITATION INDEX EXPANDED
CINAHL, Index Copernicus,
Chemical Abstracts (CA),
Excerpta Medica / EMBASE
Dil: Türkçe, İngilizce
İçerik: Orijinal Araştırma, Derleme, Editöre Mektup, Olgu Sunumu, Tıp Eğitimi, Tıbbi Kitap İncelemeleri
|
|
|
Nokodazol Hücre Döngüsü Eş Zamanlaması Için Kullanılabilir Mi?
Dr. Özgür ÇINARa,Dr. Alp CANb,Dr. Olcay OKTAY SEMİZc
aYardımla Üreme Teknikleri ve Tüp Bebek Kliniği, Ankara Etlik Doğumevi Kadın Hastalıkları Eğitim ve Araştırma Hastanesi, sup>bHistoloji-Embriyoloji AD, Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi, AnkaracSakarya Üniversitesi Sağlık Yüksek Okulu, Sakarya
Amaç: Soma hücreleri için hücre döngüsü; G1, S ve G2 aşamalarından oluşan interfaz ve bunu izleyen mitoz fazından (M-fazı) oluşur. İn vitro kültür ortamındaki hücreler aynı hücreden köken alsalar bile genellikle hücre döngüsünün farklı aşamalarında bulunurlar. Bazı proteinlerin, genlerin veya çeşitli hücre bileşenlerinin özgün değişikliklerini araştırmak için, olabildiğince çok sayıdaki hücrenin hücre döngüsünün aynı aşamasında tutulması yani hücre eş zamanlaması gerekir. Bu amaçla, mikrotübülüs depolimerizasyonu yaptığı bilinen bir benzimidazol türevi olan nokodazolun hücre eş zamanlaması için kullanımını araştırdık. Gereç ve Yöntemler: 0,3 µM nokodazol in vitro kültürü yapılan Vero hücrelerinin eş zamanlaması için kullanıldı. Nokodazol verilmeyen grup kontrol grubu olarak kabul edilirken; 6, 12 veya 18 saatlik nokodazol verilen grup deney grubunu oluşturdu. Etkinin geri dönüşümünün kontrol edildiği gruptaki hücreler ise nokodazol ile kültürden sonra yıkanıp nokodazol içermeyen medyumla 6, 12, 24 veya 48 saat inkübe edildiler. Çeşitli kültür dönemlerinden sonra hücreler tespit edilip mikrotübülüsleri (anti α+β tubulin antikoru sonrası FITC) ve çekirdekleri (7-AAD) fluoresan madde ile işaretlendi. Preparatlar konfokal mikroskopta incelendi. Nokodazol uygulanan ve kontrol grupları istatistiksel olarak değerlendirildi. Bulgular: Nokodazolun zamanla bağlı olarak hücreleri mitozda tuttuğunu saptadık. Özellikle mitozdaki hücrelerde yıkılmış mikrotübülüsler izlendi. Nokodazol kültür ortamından uzaklaştırıldığında, hücreler mitozlarını tamamladılar ve interfaz aşamasına geçtiler. Nokodazol etkisinin geri dönüşüm döneminin 12. saatinde hücrelerin neredeyse tamamının (%99) interfazda olduğu izlendi. Bu bulgu nokodazolun Vero hücrelerini eş zamanladığını göstermektedir. Bunun yanında nokodazolun Vero hücrelerinin apopitozisini de uyardığını gördük. Sonuç: Uygun doz ve süredeki nokodazolun kültürdeki Vero hücrelerinin eş zamanlaması için uygun bir madde olduğunu saptadık.Anahtar Kelimeler: Hücre döngüsü; mikrotübülüs; nokodazolTurkiye Klinikleri J Med Sci 2008, 28:437-444
|
|
|
|
|
